RNAPEI轉染試劑使用注意事項
線性PEI轉染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉染試劑廣適用于常見細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線性PEI轉染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質量控制每批次線性PEI轉染試劑均經過轉染測試。將eGFP表達質粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉染試劑轉入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,轉染16h后,超過95%的細胞表達eGFP。哪家有GMP等級的PEI轉染試劑?RNAPEI轉染試劑使用注意事項
對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉染試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉染試劑進行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產的化合物產品,每批產品出廠前都經過嚴格的檢測,保證每批產品都100%合格、穩(wěn)定且品質高,但由于作為轉染試劑使用過程中有很多實驗室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準度,dnaRNA純度,細胞狀態(tài),細胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問題或者轉染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產品純度,分子量及重量缺失破損等相關投訴,針對極個別客戶溶解問題和轉染效率問題我們能友善解決。更多關于PEI轉染試劑相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!浙江高性價比PEI轉染試劑哪里有賣GMP等級的PEI轉染試劑?
瞬時轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定適合檢測時間。
線性PEI轉染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉染試劑廣適用于常見細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線性PEI轉染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質量控制每批次線性PEI轉染試劑均經過轉染測試。將eGFP表達質粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉染試劑轉入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,轉染16h后,超過95%的細胞表達eGFP。更多關于PEI轉染試劑相關的產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉染試劑時出現(xiàn)沉淀是什么原因?
注意事項質粒質量:請務必使用高質量轉染級無內質粒(推薦使用QIAGEN或者MN公司去內質粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內)。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件:使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞。PEI轉染試劑對復合物孵化的時間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國產PEI轉染試劑好用么
如何辨別假的PEI轉染試劑?RNAPEI轉染試劑使用注意事項
穩(wěn)定轉染方法:
1.接種細胞:轉染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。
2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。
3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。
4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。
歡迎咨詢PEI產品!RNAPEI轉染試劑使用注意事項
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本文來自石嘴山市先農養(yǎng)殖有限公司:http://m.bonimir.com/Article/17a32199661.html
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半導體封裝的發(fā)展趨勢下面的<圖4>將半導體封裝技術的開發(fā)趨勢歸納為六個方面。半導體封裝技術的發(fā)展很好地使半導體發(fā)揮其功能。為了起到很好的散熱效果,開發(fā)了導傳導性較好的材料,同時改進可有效散 。
隨著高層建筑的不斷增加,門窗高空維修成為一個重要的行業(yè)需求。門窗不僅是房屋的“眼睛”,為我們提供采光和視野,更是房屋安全的一道重要防線。但當門窗出現(xiàn)問題,如玻璃破裂、窗框松動等,如何進行及時、有效的維 。
液壓抓斗本身具有開合結構,一般用液壓油缸驅動,并由多個顎瓣組成。液壓抓斗在液壓類設備中應用比較多,如液壓挖掘機、起重機、吊機等。挖掘機用液壓抓斗分為回轉和不回轉兩種,不帶回轉的抓斗采用挖掘機鏟斗油缸的 。
主要應用編輯 播報1、用在主體為大型設備,需要安裝附件,比如視鏡、機械密封座、減速機架等,這時就用到的雙頭螺栓,一端擰入主體,安裝好附件后另一端帶上螺母,由于附件是經常拆卸的,直接采用螺栓聯(lián)接主體和附 。
在選用阻燃服時需注意幾點:1、要根據(jù)作業(yè)場所存在有害因素的不同,針對性的選擇防護服及防護鞋;同時,還應考慮危險因素的嚴重程度,選擇不同的防護等級。2、選擇合格的產品。勞保用品產品屬于特種勞動防護用品, 。
排名靠前減速組件143包括用于在第二電機132和第二驅動軸143a之間實現(xiàn)動力傳遞的排名靠前類齒輪143b;第二減速組件142包括用于在第二驅動軸143a和排名靠前驅動軸142a之間實現(xiàn)動力傳遞的第二 。
不銹鋼針頭加工工藝是指在不銹鋼材料上進行雕刻、打磨、鉆孔等加工工序,以制作出符合要求的針頭產品。這種加工工藝需要使用精密的設備和工具,例如數(shù)控車床、加工中心、打磨機等,并要求操作者具有高超的技術和豐富 。
選擇進口水溶肥需要注意的幾個點:一是從企業(yè)的進出口資質上辨別;二是從進口國家的水溶肥優(yōu)勢上分析判斷,一個沒有資源和農業(yè)優(yōu)勢的國家怎么可能有好的水溶肥產品?三是了解生產技術和工藝優(yōu)勢,只有好的技術和工藝 。
餅干,作為我們日常必備的小零食,可以隨時隨地補充能量,讓你一直在線。然而,餅干的種類數(shù)不勝數(shù),有蘇打餅干、曲奇餅干、消化餅干、夾心餅干、營養(yǎng)強化餅干等等。其中曲奇餅干是小編的愛,不可以甜蜜你的心扉,而 。
防撞深標護欄的設計原理是,當車輛發(fā)生碰撞時,它能夠吸收車輛的沖擊力,并將其轉化為彈性能量,從而減少車輛的沖擊力。它的結構一般由護欄板、立柱、橫梁和連接件等組成。護欄板是防撞深標護欄的主要組成部分,它的 。
集裝箱船:租船市場企穩(wěn),拆船市場大幅放緩,新一輪甲醇燃料訂單潮來了據(jù)外媒報道,包括中遠海運、法國達飛集團CMACGM)、赫伯羅特HAPAGLLOYD)、長榮海運、日本海洋網聯(lián)船務ONE)和馬士基在內的 。